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      2015版中國(guó)藥典-野菊花 HPLC分析
      點(diǎn)擊次數(shù):4844 更新時(shí)間:2018-07-04

      ■《中國(guó)藥典》 收載情況

      【來(lái)源】 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開(kāi)放時(shí)采摘,曬干,或蒸后曬干。
      【功能與主治】 清熱解毒,瀉火平肝。用于疔瘡癰腫,目赤腫痛,頭痛眩暈。
      【含量測(cè)定】 蒙花苷照液相色譜法(通則0512)測(cè)定。
      色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水-冰醋酸(26:23:1)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為334 nm。理論板數(shù)按蒙花苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
      對(duì)照品溶液的制備:取蒙花苷對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇(必要時(shí)加熱)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
      供試品溶液的制備:取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.25 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇100 mL,稱定重量,加熱回流3小時(shí),放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
      測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 µL,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。

      ■野菊花藥材液相色譜方法的建立

      【色譜行為描述】
        《中國(guó)藥典》中野菊花的含量測(cè)定以蒙花苷為質(zhì)量評(píng)價(jià)依據(jù),蒙花苷在InertsilODS-3(4.6×250mm,5μm)中的色譜行為是:在流動(dòng)相組成為甲醇-水-冰醋酸系統(tǒng)時(shí),流動(dòng)相的比例對(duì)蒙花苷及其相鄰色譜峰的分離度有一定影響,流動(dòng)相比例為甲醇:水:醋酸=52:46:2時(shí),其分離效果與分析時(shí)間合適,選擇甲醇的比例在48%~57%(v/v)之間均可獲得較好的分析效果;柱溫對(duì)蒙花苷的保留時(shí)間及其相鄰色譜峰的分離度有微小影響,經(jīng)考察建議溫度為30℃;流動(dòng)相中醋酸對(duì)蒙花苷的分離度及拖尾因子均無(wú)明顯影響,但對(duì)分析時(shí)間有一定的改變,在醋酸濃度2%(pH=2.01)時(shí)較為合適。推薦流動(dòng)相配比范圍:甲醇:水:冰醋酸(48~57):(41~51):(1~5),柱溫范圍:25~35℃。綜上所述,經(jīng)考察在流動(dòng)相甲醇-水-冰醋酸比例為52:48:2,柱溫30℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
        野菊花在上述色譜條件下,采用Shim-pack VP-ODS色譜柱表現(xiàn)出和Inertsil ODS-3色譜柱相似的色譜行為,保留時(shí)間和柱效相當(dāng)。
      樣品來(lái)源: 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開(kāi)放時(shí)采摘,曬干,或蒸后曬干。
      對(duì)照品: 蒙花苷(成都曼斯特生物科技有限公司,批號(hào):MUST-15101207,含量:99.51%)
      對(duì)照品溶液的制備: 取蒙花苷對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇(必要時(shí)加熱)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
      供試品溶液的制備: 取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.25 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇100 mL,稱定重量,加熱回流3小時(shí),放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

      推薦使用色譜條件: 儀器配置:
      色譜柱:5020-01732 Inertsil ODS-3 (4.6×250 mm,5μm ) LC-20AD 高壓泵
      流動(dòng)相:甲醇-水-冰醋酸(26:23:1) SPD-10AVP紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器
      柱溫:30℃ DGU-20A3脫氣機(jī)
      檢測(cè)波長(zhǎng):334nm CTO-10ASVP柱溫箱
      流速:1.0mL/min SIL-10ADVP 自動(dòng)進(jìn)樣器
      進(jìn)樣量:20μL  
      *此條件同樣適用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250 mm, 5 μm),相關(guān)譜圖見(jiàn)附注1。

      ■蒙花苷對(duì)照品溶液:

      ■供試品溶液:

      ■蒙花苷標(biāo)準(zhǔn)曲線:

      ■蒙花苷的重復(fù)性:

      序號(hào)對(duì)照品(10μL)樣品(20μL)
      t/min峰面積t/min峰面積
      113.041132055812.9241442579
      213.083131674112.9501431804
      313.020131730513.0131427972
      平均值13.048131820112.9601434118
      RSD/%0.240.160.350.53

      附注1:Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm,5μm )色譜柱用于野菊花分析

      ■蒙花苷對(duì)照品溶液:

      ■供試品溶液:

       

       

       

       

       

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